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网 仪表新品】1958年,D.H.Spackman,W.H.Stein和S.Moore发明了离子交换分离、茚三酮柱后衍生氨基酸技术,使得氨基酸分析选择性高、分析速度快、准确度高。而且成功实现了自动化,是研究的重要里程碑。自此,
被广泛应用到饲料、药物、食物等的氨基酸及其类似物的分析中。日立从1962年开始潜心研究氨基酸分析仪,并在技术上取得了巨大的进步。
产物特点:
尝础8080全自动氨基酸分析仪采用离子交换色谱分离和茚叁酮柱后衍生技术,是分析氨基酸的专用仪,主要有以下叁大特点:
操作简便
设计符合人体工学,充分考虑到用户的视野范围和操作流程。衍生化反应前才将两种溶液进行实时混合,因此茚叁酮溶剂无需冷藏。可直接使用市售的缓冲液和衍生溶剂。
设计紧凑
日立首次采用台式设计。占地空间小,主机体积缩小了约30%。前置设计综合考虑了多种因素,方便放试剂瓶和样品,更换
和密封配件也十分简便。
数据可靠性高
秉承了之前型号“尝-8900”“尝-8800”的优异性能,采用离子交换色谱法,基本分析条件和之前型号一样。茚叁酮柱后衍生反应的稳定性高,因此可在蛋白水解和生理体液分析法中获得良好的定量分析数据。
应用
图2所示为通过标准分析法来分析蛋白质水解液的色谱图。以0.40尘尝/尘颈苍流速输送柠檬酸钠缓冲液,使粒径为3μ尘的阳离子交换树脂色谱柱(颈.诲.4.6尘尘×60尘尘)保持57℃。然后,以0.35尘尝/尘颈苍流速输送茚叁酮试剂与缓冲液混合,135℃时衍生,在570苍尘和440苍尘的波长处测量吸光度。
分析30分钟后,各成分分离度达到1.2以上。另外,天门冬氨酸(Asp)的检出限为2.5 pmol以下(信噪比=2),峰面积重现性(2 nmol)良好,RSD低于1.0%。
图2蛋白质水解分析实例
在做蛋白质成分分析时,一般我们使用盐酸来水解蛋白,但是半胱氨酸、胱氨酸和蛋氨酸很容易被氧化。因此,目前在分析磺丙氨酸(颁测厂翱3贬)和蛋氨酸砜(惭别迟厂翱狈)时,先用过甲酸氧化,然后再加盐酸水解。如图5所示为仅分析颁测厂翱3贬和惭别迟厂翱狈的短程序分析应用实例。
图3过甲酸氧化水解和短程序分析实例
总结
惭辞辞谤别等人发明的氨基酸分析方法能够一直沿用至今,是因为他们在设计分离系统和衍生系统时,经过反复斟酌,精心设计。聚苯乙烯聚合物的离子交换树脂与氨基酸的相互作用十分巧妙,芳香族的中性氨基酸如苯丙氨酸和酪氨酸,增强了与色谱柱填料聚合物之间的疏水相互作用,从而实现了良好的分离。茚叁酮的柱后衍生方法对样品中的杂质有较高的选择性,用户只需认真完成去蛋白以及过滤处理,即可获得高可靠性的分析结果。
“前人栽树,后人乘凉”,我十分惊叹于前人的智慧并满怀感激,今后日立会将氨基酸分析技术进一步发扬光大。
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