2019年10月25日，来自美国加州大学旧金山分校的Warner C. Greene团队在Cell杂志上发表文章Attacking Latent HIV with convertible CAR-T Cells, a Highly Adaptable Killing Platform，报道了一种新型可转换型CAR-T细胞平台，即将CTL与一系列广谱的抗HIV抗体进行结合，并证明了可转换型CAR-T平台只有与抗HIV抗体结合时，才能够高效地特异性地击杀血液、扁桃体和脾脏中HIV感染的CD4+ T细胞；接受抗逆转录病毒治疗的HIV感染者的血液中存在可诱导的潜伏池，而可转换型CAR-T细胞能在48小时内击杀其半数以上的潜伏性细胞。可转换型CAR-T细胞具有模块化功能，可以实现多个抗HIV抗体的搭载，大大提高了击杀的广度和控制能力，使其成为攻击潜伏HIV库的有力工具。
为了提高击杀被激活细胞的能力，研究人员将广谱抗HIV抗体（bNAbs）和CAR-T进行整合。配体MIC/ULBP在应激细胞中表达，其受体NKG2D在CTL和NK细胞上表达，系统利用两者天然具有结合的能力实现链接。即对NKG2D的结合口袋进行突变使其惰性化，不能够结合天然的配体；相应地，对MIC配体的α1- α2结构域进行突变，以避免与野生型NKG2D结合。这样就构建了一个独特的、唯一的正交配对系统，突变型NKG2D被格式化成CAR并表达于CD8+ T细胞，突变型α1- α2结构域与HIV bNAbs融合产生具有双特异性的MicAbody。结合实验显示，MicAbody和突变型NKG2D亲和力非常高，达到亚纳摩尔级；而且两者的结合具有特异性。同时MicAbody的Fv结构域与HIV感染细胞表面的HIV-Env蛋白抗原高效结合。为了验证转换型cCAR-T的杀伤效果，研究人员在MicAbody的重链引入两个突变，抑制了MicAbody诱发NK细胞的抗体依赖性细胞杀伤作用，确保MicAbody-cCAR-T的相互作用是杀伤的唯一来源。将B细胞特异的抗CD20单抗-rituximab搭载到cCAR-T上，有效控制肿瘤生长，而且抗肿瘤效果与传统性CAR-T相当，验证了cCAR-T的杀伤功能。
HIV MicAbody和cCAR-T的联用是否能够对HIV感染的原代CD4+ T细胞有效地击杀？研究人员利用HIV-GFP对扁桃体来源的CD4+ T细胞进行感染，然后与cCAR-T细胞进行共培养，检测其杀伤能力。对HIV感染细胞的杀伤效率与效应cCAR-T的数量相关，但过多的效应cCAR-T导致未感染HIV的CD4+ T细胞的活性降低，故效应cCAR-T：靶标细胞的比例在10:1较为合适。未搭载抗体或搭载了anti-CD20、anti-HER2 MicAbody的cCAR-T均对HIV感染细胞没有杀伤功能；只有搭载了HIV特异性MicAbody的cCAR-T具有杀伤功能，而且对未感染HIV的细胞没有影响。cCAR-T是两部分对接，且可调节式系统，其可以搭载不同MicAbody，以扩展靶向细胞的广度。同时使用搭载了anti-CD20和HIV特异性抗体的cCAR-T其对B细胞、HIV感染细胞的杀伤能力与单独使用相当，并没有削弱其杀伤功能。此外，虽然cCAR-T介导的杀伤具有高度特异性，但其效率维持在65%。这可能与感染细胞产生的HIV基因产物的数量有关，与细胞表面的Env蛋白的数量相关。对杀伤进行时间过程分析，发现共培养约10-15小时后，杀伤现象出现，HIV感染细胞的数量开始下降，表明效应细胞和MicAbody的结合、MicAbody和靶标细胞的结合需要一定的时间。
最后，研究人员对cCAR-T是否能够杀伤HIV潜在感染细胞进行测试。从6位接受ART治疗且HIV阳性受试者的血液中分离CD4+ T细胞，使用强效的潜伏逆转剂进行处理后，与cCAR-T、HIV MicAbody共培养。搭载了HIV MicAbody的cCAR-T显著降低HIV病毒滴度，bNAb-cCAR-T系统能够攻击诱导性潜伏池。
总的来说，研究报道了一种新型的转换型颁础搁-罢平台，利用狈碍骋2顿-惭滨颁的配体-受体结合作用，将“抗原识别”功能从颁础搁分子上分离出来，使用一种或多种双特异性抗体实现抗原的识别过程，并与颁础搁分子结合，从而实现对靶标细胞的精准击杀。转换型颁础搁-罢平台具有灵活性，大大扩展靶向细胞的广度和控制能力，为治疗贬滨痴提供了新的工具。
研究背景
抗逆转录病毒治疗（antiretroviral therapy，ART）可以有效抑制HIV的复制，缓解病程进展，但是潜伏性感染细胞的存在是治疗HIV的主要障碍。潜伏性感染细胞数量虽然少，但是含有整合的HIV病毒前体，构成HIV潜伏池。而且其通常不表达病毒蛋白，免疫系统不能识别而实现免疫逃逸。潜伏池越大，免疫系统控制病毒就越难，ART一旦中断病毒复发越快。几种抗逆转录病毒药物的联用能够有效控制HIV感染，抑制AIDS的发展，但HIV阳性的病人需要终身服药，并且ART药物具有一定的副作用。
“激活和击杀（shock and kill）”是减少潜伏池的一个主要方法，即潜伏性细胞暴露于一个或多个潜伏逆转剂（latency reversing agents，LRAs），诱导病毒蛋白如Env表达。Env将插入到细胞表面，被病毒诱导的细胞病变导致细胞杀伤而清除，或者被免疫细胞识别为异物而清除。但是，只有强效的LRAs能够触发病毒诱导的细胞病变导致细胞杀伤，但强效的LRAs具有毒副作用，包括诱发细胞因子风暴，在临床上使用相当有限。虽然需要寻找更加稳定、非毒性的“shock”来激活潜伏性细胞，但“激活和击杀”策略的成功实施依赖于高效率地击杀激活的细胞。HIV感染常常导致杀伤性T细胞（CTL）丧失效应功能和增殖功能，进入耗竭状态。此外，CTL抵抗性病毒株被报道。所以，如果想要提高HIV感染者的细胞免疫，对HIV潜伏池进行清除，则必须克服这两个障碍。
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